ПЦР (полимеразная цепная реакция) – это прямой метод выявления возбудителя, то есть с помощью него можно определить РНК вируса со слизистой ротоглотки или носоглотки, то есть можно определить сам коронавирус. Тест ПЦР (полимеразной цепной реакции) позволяет обнаружить ДНК вируса в генетическом материале пациента. Да, бесплатное ПЦР-тестирование в поликлинике по месту жительства положено. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — экспериментальный метод молекулярной биологии, способ значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе).
ПЦР-тестирование: как работает метод ПЦР в диагностике
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – молекулярно-генетический анализ. На данный момент времени, ПЦР тест на Ковид-19 является одним из самых эффективных методов для определения инфекции в организме пациента. ПЦР — это полимеразная цепная реакция. То, что ПЦР-тесты не могут детектировать заболевание в первые дни после инфицирования (когда еще нет симптомов), связано с недостаточным количеством вируса для анализа. Полимеразная цепная реакция почти для каждого из нас стала обыденностью, даже если этот каждый никогда и слов таких не слышал. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — важнейший лабораторный метод исследования тонкой молекулярной структуры генетического материала.
Что такое ПЦР тест на коронавирус и как правильно сдавать мазок
Полимеразная цепная реакция (ПЦР, PCR) — это точный метод лабораторной диагностики, который используют для выявления возбудителей инфекционных заболеваний. ПЦР (полимеразная цепная реакция) – это прямой метод выявления возбудителя, то есть с помощью него можно определить РНК вируса со слизистой ротоглотки или носоглотки, то есть можно определить сам коронавирус. Он показывает иммунный ответ организма (наличие антител M и G) и их уровень. Узнайте, что такое ПЦР-анализ, виды тестов и показания к проведению диагностики, преимущества и недостатки метода.
Регистрация
- Положительный ПЦР
- В России появился новый вид ПЦР-теста
- Чем отличается ПЦР от антител на КОВИД тест
- Почему "ошибаются" ПЦР-тесты - эксперт
- О рекомендациях, как подготовиться к сдаче ПЦР-теста на COVID-19 - Все новости - МЧС России
Результаты ПЦР диагностики представляют собой
- Лабораторная диагностика коронавирусной инфекции
- ПЦР: сверхчувствительная диагностика инфекций
- Дискриминация «экспресс-тестов»: почему власти признают только ПЦР?
- Когда рекомендуется пройти ПЦР-тестирование
- Тест на антитела к Covid-19
- ПЦР-тест и тест на антитела к коронавирусу: как разобраться в результатах?
Результаты анализов ПЦР
Обнаружена связь между ложноотрицательным результатом анализа и наличием высоких тромбоцитов и С-белка в крови День X Сегодня для определения того, болен человек COVID-19 или нет, используют тесты на основе полимеразной цепной реакции ПЦР. Точность этого метода диагностики не абсолютная. В итоге люди с ложноотрицательными результатами не соблюдают режим самоизоляции и заражают других. Исследователи проанализировали семь статей с четкими данными по промежуткам времени между заражением, появлением симптомов и тестированием. После исключения недостоверных данных в исследование вошло 1,3 тыс.
Результаты всё равно будут переподтверждаться ПЦР-тестом, но это время не будет потрачено впустую, потому что мы уже имеем ответ, назначили терапию, уже выдали лекарственные препараты. Но само время выполнения ПЦР занимает сутки, и через сутки нужно будет с пациентом снова встречаться и принимать решение по его лечению. Сейчас мы выходим на ситуацию, когда мы не теряем этих суток для выполнения анализа, мы сразу можем на основании предварительной диагностики с 85-процентной вероятностью констатировать заболевание, назначать терапию в зависимости от того заболевания, которое мы видим. Например, если кто-то заболел, но неделю лечился дома сам, не обращаясь к врачу. Или бесплатный тест делают только в начале заболевания при обращении в поликлинику?
В основе анализа на ПЦР лежит создание большего числа копий генетического материала ДНК или РНК с помощью этих самых праймеров и специальных ферментов посредством серии циклов нагрева и охлаждения. Полученные амплифицированные сегменты далее методом гель-электрофореза или с помощью другой технологии сравниваются с другими нуклеотидными сегментами из известного источника например, патогенного микроорганизма для определения их идентичности. Это один из основных методов обнаружения бактерий или вирусов на молекулярном уровне, с более высокой степенью точности, чем микроскопические или бактериологические исследования, и значительно более быстрый, чем метод культивирования. Это также единственный способ определить наличие генетических вариаций, указывающих на предрасположенность к онкологическим и другим заболеваниям. Чувствительность диагностических инструментов для выявления мутаций онкогенов и генов подавления опухоли была улучшена по крайней мере в десять тысяч раз благодаря ПЦР, что позволяет раньше диагностировать, например, такие виды рака, как лейкемия. Метод ПЦР также позволил разработать индивидуальную терапию для больных раком. Кроме того, ПЦР может использоваться для типирования тканей, которое имеет жизненно важное значение для имплантации органов. Образцы берут либо с помощью амниоцентеза либо с помощью биопсии ворсин хориона. В отличие от многих других тестов, ПЦР тест способен обнаружить признаки заболевания на самых ранних стадиях инфицирования, так как для выделения искомого ДНК или РНК достаточно минимального количества генетического материала патогена в образце биоматериала. Другие виды исследования могут оказаться ложноотрицательными из-за того, что в образце недостаточно много вирусов или бактерий или организм не успел выработать достаточное количество антител. ПЦР-анализ проводится на образце одного из следующих видов биоматериала: кровь, слюна, слизь, ткань, гной, мокрота, моча. Этот процесс называется ПЦР с обратной транскрипцией.
По словам доктора медицинских наук, главная проблема в том, что тест-система видит фрагменты не только живых вирусных частиц. Это бывает, если человек переболел, может быть, даже несколько недель или месяца полтора тому назад, но у него остались не целые вирусные частицы, а разрушенные части вируса. В том числе РНК его разрушенное. И делаем мазок из носо- и ротоглотки и обнаруживаем там РНК.
Диагностика инфекций методом ПЦР: что это такое?
| ПЦР: что это такое? Диагностика инфекционных заболеваний методом полимеразной цепной реакции | Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это метод молекулярно-генетической диагностики, позволяющий обнаружить в организме человека различные инфекционные заболевания. |
| Диагностика методом ПЦР: современный подход выявления инфекционных и генетических заболеваний | Молекулярное тестирование, включая тестирование с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР), выявляет генетический материал вируса и, таким образом, может определить, инфицирован ли человек SARS-CoV-2 в настоящее время. |
| Врачи рассказали, когда тесты на коронавирус могут ошибаться | Если вы не вакцинированы и не переболели, и находились на изоляции 14 дней от момента контакта с больным COVID-19, то вам ПЦР-тест не нужен, если за это время не появилось никаких симптомов и врач не выявил для тестирования никаких показаний. |
| Почему "ошибаются" ПЦР-тесты - эксперт | Метод ПЦР: анализ на гепатит С. Количественная и качественная ПЦР-диагностика: когда она нужна, что покажут анализы, как подготовиться? |
Результаты ПЦР диагностики представляют собой
- Ложноположительный ПЦР: Почему так бывает?
- Что такое ПЦР?
- О методах тестирования на коронавирус
- Специфическая
- Что такое ПЦР
Что выбрать: ПЦР-тест или тест на антитела к COVID-19?
В результатах исследования указывается, есть ли вирус в организме или нет при отсутствии инфицирования или при выздоровлении. Пройдите онлайн-тест, чтобы узнать есть ли у вас аллергия Количественный анализ: когда он нужен? Количественный анализ — способ определения вирусной нагрузки на организм. Он также может быть проведен двумя методами: определением количества частиц вируса в крови или методом ПЦР. Данный вариант показан для выявления стадии инфекции, например, перехода острой формы гепатита С в хроническую, а также для контроля эффективности лечения заболевания.
Если проводить тестирование в эти сроки, то можно получить отрицательный результат», — приводит слова заместителя директора по клинико-аналитической работе ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, профессора Натальи Пшеничной РИА Новости. Точность тестирования снижается и от того, что среди заболевших появляются вакцинированные люди. Они выделяют вирус в меньшем количестве и не такое продолжительное время, считает замдиректора Московского НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Г. Габричевского Татьяна Руженцова. ПЦР-тест будет наиболее точен на третий-пятый день с момента появления симптомов коронавируса, а экспресс-тест на антиген можно делать с первого дня появления симптомов и до пятого-седьмого дня, после этого концентрация вируса будет резко снижаться.
Их количество должно снижаться по мере выздоровления. IgG — запоминающая реакция организма на перенесенную инфекцию. Синтезируются через 6 недель после заражения и формируют иммунитет. Если в анализе на антитела есть IgA, значит, человек столкнулся с коронавирусом. Если их сопровождают IgG, то больной выздоравливает, если нет — инфекционное заболевание протекает в данный момент. Об устойчивости иммунной системы к вирусу говорит показатель IgG более 1,1. Возможен ли экспресс-анализ? Пройти диагностику на антитела можно и в домашних условиях.
Брать ее можно как из пальца, так и из вены, хотя второй способ без медсестры реализовать сложно. Проходить экспресс-диагностику на антитела лучше натощак. В набор входит одноразовый ланцет для прокола кожи. Кровь помещается в лунку тестового устройства, где смешивается с буферной жидкостью. Индикаторная реакция происходит в течение 10-20 минут. В зависимости от окрашивания определенных зон, можно обнаружить наличие IgM, IgG или их отсутствие. Какой метод диагностики лучше? Формулировать вопрос таким образом не совсем корректно.
Речь идет о двух методах с разными задачами. Тест на коронавирус, проводимый через полимеразную цепную реакцию, позволяет определить, болеет обследуемый или нет. Сравнивать его можно только с анализом крови и экспресс-наборами. Картина по итогам полноценного теста более достоверна. Обследование на антитела параллельно может подсказать, нет ли инфекции в организме на данный момент. Однако в первые дни такой метод неэффективен. Иммунный ответ формируется не сразу, поэтому ошибочный вывод об отсутствии вируса не связан с несовершенством анализа. На это требуется до 14 дней, потом по наличию IgA можно судить о состоянии больного.
Суммарно в течение 8—10 дней 2 дня до появления симптомов, 6—8 — после можем получить положительный тест на коронавирус, — рассказывает специалист медицинской клиники Gravita Family Clinic, где мы и делали тест. Как делается тест? Для теста у вас возьмут мазок из ротоглотки и носа, поместят в транспортную среду и отправят в лабораторию, спустя 4 часа результат будет готов. Да, процедура взятия биологического материала, мягко говоря, дискомфортная, но лучше так, чем дырявить себе пальцы. Тест на антиген выполняется в течение 4 часов, то есть результат можно получить день в день. Слабые стороны теста такие же, как у ПЦР: почистил зубы, покурил, поел и т. Поэтому необходимо соблюдать рекомендации сдачи анализа.
Тут, помимо положительного и отрицательного результата, есть еще и сомнительный — это когда человек только заболевает и белок еще не выработался в нужных для определения объемах. В таких случаях рекомендуется переделать анализ через 5 дней.
Сколько стоит сдать ПЦР-анализ
О сервисе Прессе Авторские права Связаться с нами Авторам Рекламодателям Разработчикам Условия использования Конфиденциальность Правила и безопасность Как работает YouTube Тестирование новых функций. это когда тестируется полимеразная цепная реакция. Чаще всего ПЦР-тест показывает ложноположительный результат из-за наличия в носу или ротоглотке фрагментов уже погибшего вируса, рассказал в интервью Лайфу доктор медицинских наук, практикующий врач, профессор Антон Ершов. ПЦР — это полимеразная цепная реакция.
Эксперт: ПЦР-тестирование является наиболее эффективным методом диагностики инфекций
Лекарственные препараты, информация о которых содержится на настоящем сайте, имеют противопоказания, перед их применением необходимо ознакомиться с инструкцией и проконсультироваться со специалистом. Мнение Администрации может не совпадать с мнением авторов и лекторов. Сайт не несет никакой ответственности за любые рекомендации или мнения, которые могут содержаться, ни за применимость материалов сайта к конкретным клиническим ситуациям. Вся научная информация предоставляется в исходном виде, без гарантий полноты или своевременности. Администрация прикладывает все усилия, чтобы обеспечить пользователей точной и достоверной информацией, но в то же время не исключает возможности возникновения ошибок.
На основании результатов ПЦР-диагностики можно будет продолжить внимательно мониторировать ситуацию с выявлением новых активных случаев заболевания. Мэр Москвы Сергей Собянин днем в четверг сообщил, что всего в день в столице проводят около 70 тыс. На сегодняшний день тестов на коронавирус делается в Москве примерно в два раза больше, чем в других регионах России. Также в городских поликлиниках проводят бесплатный ИФА-тест.
По словам доктора медицинских наук, главная проблема в том, что тест-система видит фрагменты не только живых вирусных частиц. Это бывает, если человек переболел, может быть, даже несколько недель или месяца полтора тому назад, но у него остались не целые вирусные частицы, а разрушенные части вируса. В том числе РНК его разрушенное. И делаем мазок из носо- и ротоглотки и обнаруживаем там РНК.
При получении ложноотрицательного есть вероятность, что: забор материала осуществлялся с нарушениями; анализ был взят на поздней стадии заболевания; вирус не попадал в носоглотку или быстро спустился по дыхательным путям; человек продезинфицировал полость рта антисептиком перед забором материала. Вероятность ложноположительного результата невелика. Такое возможно, если тестирование проводилось в антисанитарных условиях вирус попал в биоматериал после забора. Достоверно ли экспресс-тестирование? Различают такие виды экспресс-теста: исследование методом иммунохроматографии, использование набора реагентов. В первом случае человеку предлагается сдать кровь в медицинском учреждении. У анализа есть преимущества: низкая цена по сравнению с ПЦР; высокая скорость до получаса ; простота реализации. Однако точность его вызывает сомнения. Экспресс-анализ показывает только присутствие компонентов вируса, а не его самого. Поэтому все положительные пробы важно перепроверять методом ПЦР. С экспресс-наборами например, Standard Q Covid-19 человек работает сам. Это не аналог иммунохроматографии: кровь здесь не понадобится, достаточно мазка из носоглотки. Что именно нужно делать — написано в инструкции. При контакте биоматериала с реагентом происходит реакция с окрашиванием как с тестом на беременность. Такое исследование на коронавирус достаточно быстрое до 20 минут , однако не слишком точно. Тест на антитела Антитела к коронавирусу, выявленные в организме, показывают его реакцию на возбудитель. Если он вырабатывает специфические иммуноглобулины, это может означать, что: человек переболел COVID-19 в том числе бессимптомно ; антитела способны бороться с вирусом в случае его повторного проникновения в кровь; человек может быть донором и спасать других зараженных, кто переносит заболевание тяжелее. Если тестирование показало, что антитела к коронавирусу присутствуют, это еще не значит, что их носитель больше никогда не заболеет. Хотя статистика имеется небольшая, вирусологи пришли к выводу, что положительный тест на антитела может ненадолго приравниваться к вакцинации. Однако это справедливо в течение полугода после выявления инфекции. По истечении этого срока вновь появляются риски, и пациенту рекомендована прививка. Как расшифровать анализ на антитела? Обследуемый на антитела может иметь в организме несколько видов белков, вырабатываемых иммунной системой: IgM — реакция на любую острую инфекцию. Обычно присутствуют в организме в течение месяца после заражения, однако при COVID-19 этот срок увеличивается до 3 месяцев.
Что такое ПЦР-анализ: как его сдают, как готовиться и для чего он нужен
К сожалению, такой метод диагностики может давать ложноположительный или ложноотрицательный результат. Неточными результаты теста на коронавирус могут быть на фоне следующих факторов: Слишком рано сделан анализ. После заражения должно пройти не менее 3-6 суток. В достаточном для исследования количестве антитела возникают в крови только через 8 дней. Слишком поздно сделан анализ.
Вскоре после выздоровления из организма исчезают антитела IgM. Сколько в крови будут находиться IgG после того как человек оправится, неизвестно. Возможно, их можно будет выявить даже через год после перенесенной болезни или же они исчезнут через 2-3 месяца. Тест-полоски могут ошибаться сами по себе по причине технического сбоя.
Чем раньше будет проведена процедура тестирования, тем меньше рисков получения ложного результата. Положительный результат не означает, что пациент имеет иммунитет к данному заболеванию. Это обусловлено тем, что еще не известен уровень антител, достаточный для защиты от повторного заражения. Для чего делать анализ на антитела к коронавирусу, если его показатели часто врут?
В проведении данного исследования играет важную роль массовость. Для отдельного человека такой анализ может и не дать должного результата, но если речь идет об обществе в целом, то бесспорно значимость имеется. Тест на антитела к коронавирусу позволяет: Оценить долю переболевших. Это позволяет определить коллективный иммунитет.
Выявить численность бессимптомных носителей. Необходимо для определения групп риска и оценки тяжести болезни. Правильно распределять рабочую нагрузку. Особенно среди медперсонала важно вовремя определить зараженных для своевременной изоляции.
А также установить тех, кто уже переболел и может без опаски контактировать с носителями. Недостаточной точностью также облает исследование методом ПЦР.
Поэтому при появлении первых признаков заражение рекомендуется сдать ПЦР-тест на коронавирус. Это важно для защиты от распространения вируса и выбора оптимального метода лечения. Также такое тестирование необходимо для того, чтобы оформить больничный лист. Медицинский центр Эльклиник на Полярной предлагает услуги современной лаборатории, в которой ПЦР-тест на коронавирус выполняется быстро и профессионально. Преимущества метода ПЦР-теста при коронавирусе ПЦР-тест представляет собой наиболее эффективный метод тестирования при диагностике вирусных инфекций.
Данная методика была разработана более 35 лет, но не теряет своей актуально и в наше время.
Рисунок 1. Схема трех стадий полимеразной цепной реакции. Некоторые виды микроорганизмов, например, вирус иммунодефицита человека, хранят генетическую информацию в другой нуклеиновой кислоте — РНК, но и её фрагменты можно находить с помощью ПЦР. Именно на обнаружении этого небольшого, но уникального для каждого отдельного организма участка и построен принцип ПЦР. Для каждого возбудителя создан свой специфический генетический детектор, эталонный фрагмент ДНК, который по принципу комплементарности точно обнаруживает «свой» фрагмент ДНК и запускает реакцию создания огромного количества его копий. Один цикл ПЦР длится около трёх минут, количество копий растёт в геометрической прогрессии. Таким образом, за несколько часов количество фрагментов увеличивается в несколько миллиардов раз.
Понятно, что теперь определить, какой возбудитель у данной конкретной инфекции, достаточно легко. Достоинства Теория — это, безусловно, замечательно, но что мы имеем на выходе? Какую практическую выгоду получает человек, когда отправляется на поиски вредоносных микроорганизмов, вооруженный ПЦР? Безусловно, одно из главных достоинств — это универсальность метода. Оборудование, используемое для ПЦР, стандартно, оно не зависит от того, что именно и где именно мы ищем. Следующий плюс — высокая специфичность. В материале, направленном на исследование, определяется уникальная последовательность нуклеотидов, характерная только для конкретного возбудителя. Кроме того, это позволяет одновременно, в одном и том же материале, проводить поиск нескольких возбудителей без какого-либо ущерба для качества ответа.
Метод обладает высочайшей чувствительностью — мы уже говорили о том, что возможно найти всего один фрагмент генетического материала возбудителя.
Поэтому Корейский центр по управлению и контролю за болезнями больше не требует изоляции в таких случаях. В общей популяции пациенты у которых была коронавирусная инфекция в течение 10-14 дней, вероятно, больше не представляют опасность для окружающих. Однако это правило может не распространяться на все категории пациентов, в частности, иммунокомпрометированных пациентов или тяжело больных пациентов, находящихся в больнице. Ann Intern Med. Troy Brown, RN. May 2020.
Можно ли в реальности по ПЦР - тестам определить и доказать ковид-19
Узнайте, что такое ПЦР-анализ, виды тестов и показания к проведению диагностики, преимущества и недостатки метода. Обзор 28 исследований показывает, что ПЦР-тест остаётся положительным в среднем 18 дней. Однако у примерно 20% людей ПЦР-тест остается положительным еще в течение нескольких месяцев. ПЦР-тест точнее всего определяет COVID-19 на третий-пятый день с момента появления симптомов, а экспресс-тест на антиген можно делать с первого дня. Что показывает анализ ПЦР. Анализ позволяет обнаружить присутствие генетического материала инфекционных возбудителей. ПЦР в гинекологии и в урологии широко применяется для выявления скрытых и труднодиагностируемых инфекций. Когда нужно сдавать ПЦР-тест. В Роспотребнадзоре объяснили ложноотрицательные ПЦР-тесты при COVID-19. А платно в Беларуси ПЦР-тесты на коронавирус предусмотрены только для выезжающих за рубеж, по цене что-то в районе 40 рублей.
О методах тестирования на коронавирус
Тут, помимо положительного и отрицательного результата, есть еще и сомнительный — это когда человек только заболевает и белок еще не выработался в нужных для определения объемах. В таких случаях рекомендуется переделать анализ через 5 дней. Правила сдачи ИФА на ковид Подготовка к тесту на антиген будет следующей: За сутки отказаться от алкогольных напитков, даже пива и вина. За 12 часов — не пользоваться средствами антисептики и обезболивания для ротовой полости аэрозоли для орошения горла, рассасывающие таблетки, полоскания. За 4 часа — не курить. За 2 часа — не чистить зубы и не пользоваться ополаскивателем для рта. За 2 часа — не кушать и не пить в случае сильной жажды можно сделать пару глотков чистой воды минимум за полчаса до взятия мазков. Не пользоваться жевательной резинкой.
Что насчет заграницы, куда пускают?
Результат появляется через 20-30 минут. Наибольшую точность тест показывает в первую неделю после заражения. В дальнейшем повышается вероятность получения ложноотрицательного результата. Для уточнения диагноза лучше сделать ПЦР-тест. Анализ на антитела к коронавирусу Анализ на антитела к коронавирусу показывает не присутствие инфекции в организме, а ответ иммунной системы на нее. В ответ на заражение она вырабатывает несколько типов иммуноглобулинов: IgA являются реакцией непосредственно на коронавирус; IgM синтезируются при наличии инфекции в организме указывают на острое течение заболевания ; IgG появляются, когда тело «запоминает» вирус и формирует иммунитет к нему. Недостаточно, чтобы антитела были просто выявлены. Нужно смотреть и на их комбинацию.
Сдать такой анализ нужно, чтобы узнать, вырабатывает ли организм антитела к вирусу, а если да, то сколько. Тесты на антитела Разные виды тестов на антитела к коронавирусу проводятся дома или в лаборатории. В лаборатории берут кровь из вены и выполняют количественную оценку вырабатываемых иммуноглобулинов. Домашний тест покажет, есть ли антитела в принципе. Сколько их вырабатывается, с его помощью узнать нельзя: для этого требуются познания в биохимии и специальное оборудование для подсчета. В этом случае достаточно капиллярной крови из пальца. Проколоть себе палец может не каждый, поэтому стоит прибегнуть к помощи близких или вызвать медсестру. Анализ сдают натощак. Поесть можно максимум за 12 часов до забора крови.
Диагностику следует отложить при повышении температуры. Что показывает тест на антитела? Наличие иммуноглобулинов означает, что пациент либо болеет сейчас, либо переболел коронавирусом недавно. Если антитела отсутствуют, он либо не заражался никогда, либо микроорганизм попал в тело совсем недавно. Иммунный ответ формируется до двух недель.
Транспортировка, если она необходима, должна проводиться в специальных термоконтейнерах или термосах с соблюдением всех правил хранения и перевозки биоматериалов.
Выделение ДНК из образца. Способ выделения зависит от вида определяемого микроорганизма и от вида биологического образца. Если, например, анализируется соскоб эпителиальных клеток, используется так называемый метод твердофазной сорбции, заключающийся в добавлении в образец специального вещества, концентрации ДНК на сорбенте и его многократной отмывке буферным раствором. Проведение ПЦР. Некоторое количество образца из биологической пробы переносится в специальную микроцентрифужную пробирку. Туда же добавляется амплификационная смесь, имеющая сложный состав, в объеме 25 мл.
Пробирки устанавливают в программируемый термостат, и автоматическом режиме проводится амплификация. Время ее проведения зависит от заданной программы и составляет 2—3 часа. Одновременно с опытными пробами проводятся контрольные — положительные, включающие в себя контрольный препарат ДНК исследуемого возбудителя, и отрицательные, не содержащие исследуемую ДНК. Количество циклов амплификации варьирует от 30 до 40, более 40 циклов проводить не рекомендуется, так как это способствует увеличению количества неспецифических продуктов в пробе. Регистрация результатов. Фрагмент ДНК, характерный для возбудителя инфекции, выделяют методом электрофореза в присутствии специального вещества — бромистого этидия.
Его соединение с фрагментами ДНК дает светящиеся полосы при облучении ультрафиолетовым излучением. Образец помещают в камеру для электрофореза и в течение 35—40 минут проводят разделение продуктов амплификации. После этого образец просматривают в ультрафиолетовом свете — наличие оранжевой светящейся полосы свидетельствует о положительном результате. Интерпретация результатов исследования. Результат ПЦР-диагностики может быть либо положительным, либо отрицательным. Положительный результат говорит о том, что в организме человека обнаружены следы инфекции, причем именно в данный момент времени.
Количественный результат ПЦР-анализа оценить может только врач, они индивидуальны для разных типов инфекций. На основании количественного результата можно сделать вывод о степени активности заболевания и определить характер лечения. Цены на ПЦР-диагностику Цена ПЦР-диагностики зависит от того, на какую конкретно инфекцию пациент планирует проверяться, от вида анализируемого материала, методики тестирования — качественной или количественной. Цена за определение одной инфекции составляет от 200 до 800 рублей в разных клиниках. Кроме того, к стоимости анализа добавится и плата за забор биоматериала — около 400 рублей. Средняя стоимость ПЦР-диагностики разных видов приведена в таблице 1.
Таблица 1.
Официальной датой изобретения этого метода диагностики считают 1983 год, а «родителем» - американского биохимика Кэри Муллиса. Он хотел создать метод, благодаря которому можно было бы амплифицировать ДНК увеличивать число её копий в ходе многократных последовательных удвоений исходной молекулы ДНК с помощью фермента ДНК-полимеразы. Это событие стало поистине революционным и оказало в последующем серьёзное влияние на развитие молекулярной биологии, генетики и медицины. Подтверждение этому - Нобелевская премия в области химии, которой был удостоен К. Муллис в 1993 году.